连接上载体之后，跑胶时目的片段为何比原大小大一点

在分子生物学中，将目的DNA片段连接到载体（如质粒）后，在跑胶时观察到目的片段比原大小大一点，这通常有以下几种原因：

1. 载体大小：目的DNA片段连接到载体后，整体的大小会等于目的DNA片段的大小加上载体的大小。因此，跑胶时观察到的条带会比原来的目的DNA片段大。

2. 连接效率：连接反应可能不是100%高效的，可能会有部分目的DNA片段没有成功连接到载体上，导致跑胶时看到的条带比预期的小。但是，如果连接效率较高，大部分目的DNA片段都连接到了载体上，那么整体大小会接近目的DNA片段和载体大小之和。

3. 酶切位点：如果目的DNA片段或载体上含有酶切位点，酶切后可能会产生额外的片段。例如，如果载体上有两个酶切位点，那么连接后的DNA可能会在两个位点之间产生一个额外的片段。

4. 载体结构：某些载体可能包含额外的序列，如复制原点、选择标记等，这些序列会增加整体的分子量。

5. 电泳条件：跑胶时的电泳条件（如电压、缓冲液等）可能会影响观察到的条带大小。

6. DNA质量：如果目的DNA或载体DNA质量较差，可能会出现非特异性扩增或降解，导致跑胶时条带大小不正常。

连接上载体后跑胶时目的片段比原大小大一点，主要是因为载体本身的大小以及连接反应的效率。在实际操作中，可以通过酶切鉴定或测序来确认连接是否成功，并确定目的DNA片段的确切大小。